中科光华(西安)智能生物科技有限公司
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姜欣
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陕西 西安市 长安区
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试剂、抗体、技术服务、实验室仪器 / 设备
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酶染色时如采用新鲜组织冰冻切片,会影响酶的准确定位,有没有更好的方法?
人阅读 发布时间:2021-09-10 16:13
对于常规实验室的大多数诊断目的,非固定组织的冰冻切片是适合的。冰冻非固定组织的结果是可导致不稳定物质的弥散。切片时后者还会增强,因为切片时会产生热量,可导致轻微解冻。这可能不会导致诊断困难,但会影响酶的准确定位,例如酸性和碱性磷酸酶。为了定位水解性酶和其他抗原,组织在切片前就应固定。固定时组织必须是新鲜的,将组织置于4℃formal calcium溶液固定18小时。这种方法概述如下:
1.树胶蔗糖液:蔗糖60g+蒸馏水200ml,储存在4℃环境下。
2.方法:
①将新鲜组织块置于4℃formal calcium溶液中固定18小时。
②在流动水中冲洗,或如果组织块小或脆,在蒸馏水中短时间冲洗,如空肠活检。
③吸干。
④将组织置于树胶蔗糖溶液中18小时,小组织块时间更短一些。
⑤吸干。
⑥将冰冻组织放在组织块固定器上,固定后,将组织块缓慢冷冻,以避免由于组织内冰块迅速扩展导致的损伤,对于绝大部分固定组织,在冰柜通过将组织块直接冰冻可获得可接收的结果。
⑦冷冻切片。
1.树胶蔗糖液:蔗糖60g+蒸馏水200ml,储存在4℃环境下。
2.方法:
①将新鲜组织块置于4℃formal calcium溶液中固定18小时。
②在流动水中冲洗,或如果组织块小或脆,在蒸馏水中短时间冲洗,如空肠活检。
③吸干。
④将组织置于树胶蔗糖溶液中18小时,小组织块时间更短一些。
⑤吸干。
⑥将冰冻组织放在组织块固定器上,固定后,将组织块缓慢冷冻,以避免由于组织内冰块迅速扩展导致的损伤,对于绝大部分固定组织,在冰柜通过将组织块直接冰冻可获得可接收的结果。
⑦冷冻切片。