中科光华(西安)智能生物科技有限公司
入驻年限:6 年
- 联系人:
姜欣
- 所在地区:
陕西 西安市 长安区
- 业务范围:
试剂、抗体、技术服务、实验室仪器 / 设备
- 经营模式:
生产厂商 科研机构
公司新闻/正文
动物实验中的不脱蜡染HE的方法如何操作?
人阅读 发布时间:2021-11-26 17:24
石蜡切片常规染色法制片周期较长,染色流程烦琐,由于伊红极易溶于乙醇,故在染色后脱水时伊红极易褪色,乙醇和二甲本的耗费量较大。为了进一步改进普通染色法的这些缺点,采用重各酸钾明胶粘片,不脱蜡染色,可以取得较为满意的效果,现介绍如下。
1.制作粘片剂及粘片:
① 重各酸钾明胶粘片剂的配制:5g明胶及0.15g重各酸钾同时加入300ml蒸馏水中,加热使之完全溶解,冷却后过滤,待用。
② 粘片:用一细玻璃棒插入上述粘片剂,待玻璃棒上的液体不再下流为宜,然后一次涂布在载玻片上,滴加适量蒸馏水,将蜡片置于载玻片上,在酒精灯上小心加热展片(或用温水展片),切忌蜡片熔化。
2. 制作温台及烘片:
① 将恒温水浴的盖取下,换上一块大小合适的玻璃,玻璃上再铺一层纱布(减慢传热的速度),即制成一个温台(或用灯泡制作温台亦可),水浴的水温保持在45℃。
② 将粘好蜡片的载片倾去多余的水。置于温台上,约经2小时即可染色。或将粘好的切片置于通风处使其自干亦可。
3. 染色:
① 组织若系含升共的固定液固定,则在染色前不经脱蜡先用1%碘酒脱汞,然后再用80%乙醇脱碘。
② 若组织不含升共,可不脱蜡直接入纯乙醇,1~3分钟,然后置人蒸馏水,1~3分钟。
③ 入苏木晶染液,再用自来水洗去多余的浮液。
④ 酸乙醇分色,然后在自来水中反蓝。
⑤ 入蒸馏水,1~3分钟。
⑥入伊红染液,然后用蒸馏水洗去浮液。
⑦ 入70%乙醇,80%乙醇分色。
⑧ 用滤纸将多余的乙醇吸去,约经20分钟可自干。
⑨ 脱蜡及透明,将晾干后的切片置入二甲本中2〜3次,各3~5分钟。
⑩ 封固。
1.制作粘片剂及粘片:
① 重各酸钾明胶粘片剂的配制:5g明胶及0.15g重各酸钾同时加入300ml蒸馏水中,加热使之完全溶解,冷却后过滤,待用。
② 粘片:用一细玻璃棒插入上述粘片剂,待玻璃棒上的液体不再下流为宜,然后一次涂布在载玻片上,滴加适量蒸馏水,将蜡片置于载玻片上,在酒精灯上小心加热展片(或用温水展片),切忌蜡片熔化。
2. 制作温台及烘片:
① 将恒温水浴的盖取下,换上一块大小合适的玻璃,玻璃上再铺一层纱布(减慢传热的速度),即制成一个温台(或用灯泡制作温台亦可),水浴的水温保持在45℃。
② 将粘好蜡片的载片倾去多余的水。置于温台上,约经2小时即可染色。或将粘好的切片置于通风处使其自干亦可。
3. 染色:
① 组织若系含升共的固定液固定,则在染色前不经脱蜡先用1%碘酒脱汞,然后再用80%乙醇脱碘。
② 若组织不含升共,可不脱蜡直接入纯乙醇,1~3分钟,然后置人蒸馏水,1~3分钟。
③ 入苏木晶染液,再用自来水洗去多余的浮液。
④ 酸乙醇分色,然后在自来水中反蓝。
⑤ 入蒸馏水,1~3分钟。
⑥入伊红染液,然后用蒸馏水洗去浮液。
⑦ 入70%乙醇,80%乙醇分色。
⑧ 用滤纸将多余的乙醇吸去,约经20分钟可自干。
⑨ 脱蜡及透明,将晾干后的切片置入二甲本中2〜3次,各3~5分钟。
⑩ 封固。