中科光华(西安)智能生物科技有限公司
入驻年限:6 年
- 联系人:
姜欣
- 所在地区:
陕西 西安市 长安区
- 业务范围:
试剂、抗体、技术服务、实验室仪器 / 设备
- 经营模式:
生产厂商 科研机构
公司新闻/正文
冰冻组织切片制作的一些问题及解决方案
人阅读 发布时间:2022-02-11 17:59
冰晶
由于组织缓慢冻结
解决方案:快速冻结; 冻结越快,冰晶越小,组织损伤越少(好的冷冻方法可以说是液态氮)
1.较小的组织产生较少的伪影 - 最佳组织应为0.5×0.5×0.3cm或更小
2.切勿冻结大于卡盘直径的碎片
3.避免冻结组织周围的脂肪
4.在制作块之前,用纱布将组织的外表面涂抹干燥
刀片
带切口的切割刀片会在切开部分产生裂开/撕裂
解决方案:每隔几个案例更换刀片; 一些机构为每个案件使用新刀片
过度/不足
过度冻结会导致截面有孔
解决方案:用一个额外的刀片转动抛光块,通过用手指按压它来产生摩擦和预热块(5 - 10秒)
对于脂肪组织来说,低温冻结会很麻烦
解决方案:
添加散热片以阻止或选择低温恒温器上的快速冻结设置(如果可用)
染色问题
脏的“污渍线”会导致漂浮物(外来的外来组织)粘附在载玻片上; 过度稀释的污渍和酒精会降低滑动质量
由于核细节受损,染色不良会阻碍冷冻切片的诊断
解决方案:
1.通过频繁的溶液更换保持清洁的污渍线;
2.遵循建议的染色时间;
3.不要急于求成
注意:
1.脑组织最好在曙红中染色60秒以上
2.水:每个冰冻部分后应更换
3.酒精和污渍:至少每周更换一次,根据工作量,可能需要更频繁地更换酒精
脂肪组织
包括淋巴结,乳房,皮肤; 可能太软而无法切割
解决方案:保持极冷的切割温度(-20℃)
坚固的淋巴结,脾脏,脑和肝脏在-10℃切开更好; 如果在较低温度下进行切片,组织可能会破碎
气泡
可能被困在盖玻片下,这可能导致下面的组织变干
解决方案:确保使用适量的树脂(2滴); 用手指或镊子轻轻地将气泡从载玻片上移开; 请勿过度按压滑块或将其折断
部分过厚
可能导致组织滑落
解决方案:减少低温恒温器的切片厚度
由于组织缓慢冻结
解决方案:快速冻结; 冻结越快,冰晶越小,组织损伤越少(好的冷冻方法可以说是液态氮)
1.较小的组织产生较少的伪影 - 最佳组织应为0.5×0.5×0.3cm或更小
2.切勿冻结大于卡盘直径的碎片
3.避免冻结组织周围的脂肪
4.在制作块之前,用纱布将组织的外表面涂抹干燥
刀片
带切口的切割刀片会在切开部分产生裂开/撕裂
解决方案:每隔几个案例更换刀片; 一些机构为每个案件使用新刀片
过度/不足
过度冻结会导致截面有孔
解决方案:用一个额外的刀片转动抛光块,通过用手指按压它来产生摩擦和预热块(5 - 10秒)
对于脂肪组织来说,低温冻结会很麻烦
解决方案:
添加散热片以阻止或选择低温恒温器上的快速冻结设置(如果可用)
染色问题
脏的“污渍线”会导致漂浮物(外来的外来组织)粘附在载玻片上; 过度稀释的污渍和酒精会降低滑动质量
由于核细节受损,染色不良会阻碍冷冻切片的诊断
解决方案:
1.通过频繁的溶液更换保持清洁的污渍线;
2.遵循建议的染色时间;
3.不要急于求成
注意:
1.脑组织最好在曙红中染色60秒以上
2.水:每个冰冻部分后应更换
3.酒精和污渍:至少每周更换一次,根据工作量,可能需要更频繁地更换酒精
脂肪组织
包括淋巴结,乳房,皮肤; 可能太软而无法切割
解决方案:保持极冷的切割温度(-20℃)
坚固的淋巴结,脾脏,脑和肝脏在-10℃切开更好; 如果在较低温度下进行切片,组织可能会破碎
气泡
可能被困在盖玻片下,这可能导致下面的组织变干
解决方案:确保使用适量的树脂(2滴); 用手指或镊子轻轻地将气泡从载玻片上移开; 请勿过度按压滑块或将其折断
部分过厚
可能导致组织滑落
解决方案:减少低温恒温器的切片厚度