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切片优化步骤

人阅读 发布时间:2022-03-10 17:22

1使用高质量的刀片
✔使用高质量、锋利的刀片进行切片;
❌刀片用到不能再用——可以接受少量刀痕。




A、脾脏H&E染色结果:图中可以看到很多因刀片缺陷而产生的刀痕;
B、皮肤组织切片进行展片,可以看到组织上有多条很明显的刀痕,展片的时候刀痕很容易看到。

2优化刀片倾斜的角度
✔根据切片机以及刀片类型进行一定的倾斜,确保最合适的切片角度;
❌刀片倾斜角度不因实际情况(不同的切片机、刀片和石蜡等)进行改变。




这个短的蜡带是冰蜡块上切下的有30%~40%皱起,重新调整刀片的角度后这一情况得到改善。

3小心修块
✔蜡块需要进行修蜡,以暴露组织。修蜡的最后几刀,是为了使蜡块表面光滑;
❌为了节省时间,匆匆修蜡。蜡块表面不光滑就进行切片,切面就像虫咬过一样,到处都是小的、零乱的空洞。




蜡块表面不光滑就进行切片,导致切片有空洞(筛网状)及破碎不齐的现象(H&E

4避免冰冻对组织的破坏
✔蜡块在冷台上冷却,并保证切片时也是冷却状态(表面融冰正好);
❌蜡块在切之前已经冷冻,这很容易引起蜡块冻裂。




由于在切片之前蜡块已经放到-15℃冰柜中进行冷冻,蜡块表面有裂痕。裂痕会对切片和展片有影响,因为蜡和组织连接不紧密。

5蜡块需冷却
✔需保证切片时蜡块是冷的;
❌切片过程中在采集需要的蜡片时,蜡块已变热。




A、肾切片中肾小球变形(H&E)是因为在切片过程中过度挤压;
B、图中切片来自同一个蜡块,左边切片没有进行冷却,而右边的蜡块是冷却后再切。

6缓慢切片
✔每一个蜡块最终需要的切片需进行匀速、缓慢地切片;
❌认为所有切片皱褶的在展片过程中都能消除,所以有的技术员在切片中常进行快速的切片。


A、啮齿类动物肝脏(网状纤维染色)有规则的颤痕,原因在于对冷却的易脆组织切片太快。为避免这种情况产生,可以待蜡块稍微变暖然后慢慢切片。如果蜡块或者刀片没有在切片机上很好地固定也有可能导致这种颤痕;
B、图中粘膜组织的H&E切片显示有规则的颤痕,原因在于对冰冻的蜡块切片速度太快。

 

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