中科光华(西安)智能生物科技有限公司
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HE染色切片经常出现部分区域颜色发灰的现象,如何应对?
人阅读 发布时间:2022-04-15 15:59
常规石蜡切片苏木静伊红染色,镜检发现某些区域组织结构发灰,即细胞核内染色质及核仁显示不清,呈淡蓝色云雾状,该现象严重时影响病理诊断。可以采用以下由郑伟等创达的处理方法:
1. 加热取下盖玻片。
2. 二甲笨彻底除去切片上的中性树胶。
3. 由高至低梯度乙醇洗去二甲笨,充分水洗。
4. 切片放人0. 25%高锰酸甲溶液中5分钟,水洗.
5. 再入2%草酸溶液中2分钟,充分水洗。
6. 人Harris苏木静染液15分钟,水洗。
7. 常规分色反蓝,镜下观察细胞核内染色质及核仁至清晰为止。
8. 伊红染色,脱水、透明、封固。
9. 石蜡切片发灰的组织结构,处理后大多能显示清晰的细胞核内染色质及核仁
10.苏木静伊红染色组织结构发灰的原因:
(1)一是石蜡切片的组织同定不及时,或组织块取材太厚,影响组织的固定、脱水、透明和浸蜡。
(2)二是由于在制片过程中人为造成组织片的干涸。0.01%氢氧化纳、0.5%安水、饱和碳酸氢钠水溶液能将原切片苏木静、伊红染色完全脱净,本方法关键在于延长苏木静的染色时间,从常规切片在Harris苏木静染液中作用3〜5分钟,延长至15分钟。其原理为:苏木静经氧化成熟变为氧化苏木静,并需在媒染剂的作用下才具有染色能力。未固定好的组织细胞核、细胞退变和人为造成干涸的细胞核与氧化苏木静结合能力差,如延长苏木静染液的染色时间,可加强两者结合力,使核内染色质及核任较清晰的显示出来。该法的优点是方法简便、快速、效果好。