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Mallory染色法在椎间盘退变组织染色中如何应用?

人阅读 发布时间:2021-12-31 17:16

椎间盘退变的同时伴随有组织结构和成分的改变。采用多种染色剂连续复染形成多元色的组织学图形,可观察到各组织成分的不同颜色以及椎间盘退变时的颜色变化,在分辨力的显现上,比单纯形态学的改变更明显且易于分辨。采用Mallory三色染色可以帮助从组织形态和颜色变化两方面观察椎间盘的病理改变。
椎间盘退变的组织病理学评价目前公认的方法是采用苏木京-伊红和番红-O染色,再根据形态学的变化进行半定量分级评价。由于椎间盘结构和成分复杂,且退变时伴随有组织结构和成分双重变化,而目前所用染色方法颜色单一,主要包括Weigert苏木京、阿新蓝、天狼星红和Masson三色法等,存在着形态和成分变化不能兼顾分析的问题。近来有研究认为,采用多种染色剂连续复染形成多元色的组织学图形,可观察到各组织成分的不同颜色以及椎间盘退变时的颜色变化,在分辨力的显现上,比单纯形态学的改变更明显且易于分辨。但椎间盘退变过程的形态和颜色是否同步变化至今仍少有报道。
采用Mallory三色染色法,对腰椎间盘进行染色,从组织形态和颜色变化两方面观察椎间盘髓核、 软骨终板和纤维环等区域的特征性变化。这里介绍由孔焕宇等所作的采用Mallory三色染色法,对腰椎间盘进行染色的方法。
实验方法:
1. 样本取完整椎体。
2. 多聚甲全溶液固定48小时。
3. 5%盐酸+5%甲酸+75%乙醇混合溶液(PH 2.2)中脱钙。
4. 80%90%95%100% 乙醇逐级脱水。
5. 二甲本透明。
6. 石蜡包埋。
7. 包埋样本连续切片。依据椎间盘和纤维环的结构特征,制备5um厚的包含上下椎体的椎间盘冠状面切片。
8. Mallory三色染色:Mallory三色染色法使用的染料和试剂为苯胺蓝、橘黄G、酸性复红、重各酸钾、磷钨酸和乙酸。椎间盘组织切片按Mallory三色染色法进行染色。
 

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